6 2025.11
矽膠離心柱純化RNA提取試劑盒操作步驟詳解
核心原理概述
該試劑盒的核心原理是：利用高離序鹽（如鹽酸胍，通常存在於溶液RL中）使細胞裂解，同時抑製RNase活性；然後通過調節鹽濃度和乙醇濃度，使RNA選擇性地吸附到矽膠膜上；之後 [...]
21 2025.04
KASP引物設計開發
KASP（Kompetitive Allele-Specific PCR，競爭性等位基因特異性PCR）是一種基於PCR的基因分型技術，主要用於檢測單核苷酸多態性（SNP）和其他特定基因變異。廣泛應用於農業育種、醫學研究 [...]
13 2025.03
怎樣在線做PCR引物設計
要先對PCR目的序列的長度有個大致估計：
第一步：找到Primer3的站點。你不用記住這個站點，但是要記住“Primer3”這個詞，然後打開GOOGLE首頁，輸入Primer3，跳出來的第一個項目就是了“Prim [...]
13 2025.03
DNA電泳常見問題分析之一
1 請問配製聚丙烯酰胺凝膠電泳膠時，促凝的是TEMED還是過硫酸銨？膠聚時間很長如何解決？
過硫酸銨提供驅動丙烯酰胺和雙丙烯酰胺聚合所需的自由基，而TEMED通過催化過硫酸銨形成自由基而 [...]
13 2025.03
PCR常見問題分析之二/克隆
1 克隆PCR產物的最優條件是什麼？
最佳插入片段：載體比需實驗確定。1：1（插入片段：載體）常為最佳比，摩爾數比1：8或8：1也行。應測定比值範圍。連接用5ul 2X連接液, 50ng質粒DNA,1Wei [...]
13 2025.03
核酸純化常見問題分析之二/質粒提取
1、從柱離心式產品的流行看經典方法的缺點 （或者操作重點）
柱式方法的風行是無法否定的現實。下麵通過柱式方法與經典方法的比較，看一看如何注意經典方法的操作重點。
裂解，二者幾乎沒 [...]
13 2025.03
如果不慎發生汙染情況，該怎麼辦？
如果不慎發生汙染情況，應從下麵幾條出發，逐一分析，排除汙染。
（1）設立陰陽性對照：有利於監測反應體係各成分的汙染情況。選擇陽性對照時，應選擇擴增弱，且重複性好的樣品，因強陽性 [...]
13 2025.03
PCR常見問題分析之一
1 PCR產物的電泳檢測時間
一般為48h以內，有些最好於當日電泳檢測，大於48h後帶型不規則甚致消失。
2 假陰性，不出現擴增條帶，應該怎麼辦？
PCR反應的關鍵環節有①模板核酸的製 [...]
13 2025.03
核酸純化前應了解的常見問題
1、 在提核酸前，對實驗樣品你應該知道什麼？
樣品的核酸含量、酶含量、特殊雜質含量。
絕大情況下，使用新鮮樣品可以獲得最好的結果，但對一些雜質含量高的樣品，-20℃保存一天後抽提，可 [...]
13 2025.03
PCR操作時應注意的事項
PCR檢測微量感染因子時，容易因為汙染的而導致各種問題，因此，進行PCR操作時，操作人員應該嚴格遵守一些操作規程，最大程度地降低可能出現的PCR汙染或杜絕汙染的出現。
（1）劃分操作區 [...]
13 2025.03
PCR Mix的擴增產物能直接測序嗎？
可以。測序公司在進行PCR產物直接測序前，會對PCR產物進行純化，去除體係中影響測序的組分，所以PCR Mix中的溴酚藍並不會影響後續測序反應。
東盛生物提供含溴酚藍和不含溴酚藍兩種體係， [...]
13 2025.03
實驗室自己可以配製PCR Mix嗎？
可以。但實驗室自配的PCR Mix穩定性差，無法長期保存，且易出現靈敏度低、擴增長度短、重複性差等問題，而東盛的PCR Mix添加了特殊的穩定劑，可以確保在室溫2周或-20℃2年的條件下，擴增效 [...]